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NuSmart®核酸直接釋放技術和標準核酸提取技術的不同
更新時間:2024-06-17   點擊次數:694次

NuSmart®核酸直接釋放技術和標準核酸提取技術不同

基因組DNA提取作為分子生物學最常規(guī)技術之一是每個實驗室研究人員最熟悉的技術。而想獲得基因組DNA只需要將核酸外的結構破壞就能夠將核酸釋放出來。常見有以下幾種方法,包括機械力裂解、酶裂解以及化學裂解。這幾種方法的區(qū)別見下表:

方法

機械力裂解

酶裂解

化學裂解

原理

外力破壞細胞壁和/或細胞膜

消化蛋白質結構以及破壞組蛋白的纏繞

緩沖液體系中加入去垢劑破壞脂膜并釋放內部成分

優(yōu)勢

操作簡單、快速

無需機械力

操作簡單

無需其他設備

劣勢

多樣本時比較耗時

處理過程中產熱導致基因組降解

基因組容易斷裂

需要研磨設備

價格昂貴

耗時

 

釋放的抑制物對下游擴增有影響

不適合zhi定細胞器基因組的獲得

 

落實在產品上,實驗室標準核酸提取純化包括有機提取、硅膠柱離心提取、磁珠吸附提取。這幾種方法對比如下表:

方法

有機提取

硅膠柱提取

磁珠提取

原理

苯酚-氯仿抽提和離心進行分離和純化

通過機械力和/或酶裂解釋放核酸,硅膠柱與其形成靜電吸附,通過離心和鹽粒子洗滌進行分離純化

通過機械力和/或酶裂解釋放核酸,帶電磁珠與其吸附,在磁場作用下進行分離純化

樣品

細胞、組織、植物等

所有樣品類型

所有樣品類型

純度

通量

低通量

中通量

高通量

優(yōu)勢

充分裂解

價格便宜

特別適合難處理樣本

操作方便

產量和純度都高

可處理多種樣本

產量高

不會堵塞

設備自動化操作

劣勢

使用有毒有害化學試劑

不易購買

容易堵塞

產量有上限

不利于微量樣本操作

耗時

30-60分鐘

30-60分鐘

30分鐘

通過對比發(fā)現(xiàn)以上方法操作復雜、費時費力且危險,為了解決這一問題,我們推薦NuSmart®核酸直接釋放技術。該方法只需要5分鐘,不同溫度環(huán)境下,無需重復訓練即可完成核酸直接釋放。結合下游開發(fā)試劑盒,wan全能夠滿足常規(guī)分子生物學實驗室的需求。

方法

NuSmart®核酸直接釋放技術

標準/傳統(tǒng)核酸提取法

原理

通過zhuan利試劑破壞細胞壁/膜和細胞核膜,wan全釋放基因組DNA。特殊納米材料提高PCR靈敏度

通過機械力和/或酶裂解細胞釋放核酸,硅膠柱等材料與其吸附,通過離心/磁場作用進行提取純化

樣品

任何樣本類型

任何樣本類型

樣品量

細胞:1-103

組織:1-2mm

植物葉片:1-4mm

微生物培養(yǎng)液:10uL

細胞:>106

組織:>10mg

植物葉片:>100mg

微生物培養(yǎng)液:0.5-1mL

耗時

5分鐘

30-60分鐘

通量

高通量

硅膠柱法:中通量

磁珠法:高通量

優(yōu)勢

對于小量和微量樣本十分友好

操作簡單,無需訓練

基因組完整性好

無酶、無有機試劑

無大型設備投入

 

操作方便

產量高

純度高

劣勢

基因組容易斷裂

操作步驟多、費時

需要設備

 

 

 

 

 


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