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RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑-AD600025試劑
更新時間:2022-01-20   點擊次數:1035次

簡要描述:

RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑,此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發及生產的主要關鍵技術之一。

一、產品說明:

1、產品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規格

貨號:AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

規格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、儲存條件

常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復凍融。

二、RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑轉染質粒8100bp效果圖和轉染條件

轉染條件

質粒DNA大小:8100bp

培養板:6孔板

轉染試劑用量:6ul

質粒DNA用量:電訊

轉染試劑:Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑

轉染時間:48小時

血清:Z7010FBS-500澳洲胎牛血清

細胞凍存:CE70100T無血清細胞凍存液

三、RAW264.7小鼠單核巨噬細胞轉染試劑操作步驟:

材料準備

RNA 濃度 20 uM /L

質粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul(注意:①溶解于無菌雙蒸水或超純水;②無內毒素 )

提前 1 天接種細胞:細胞匯合度在 60-80%左右,再進行轉染。

核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養基中加入核酸復合物:根據參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻;細胞培養基 里面可以含有血清。

細胞換液:轉染 24 小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉染過程中不用換液。

分析結果:質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩定表達細胞株的篩選,則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。

 

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